做PCR为什么没结果啊 - 雨露学习互助

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如果marker能看清楚,那么考虑PCR的问题.marker看不清,重做电泳.
如果没有条带,PCR反应的成分也都加全了,主要从以下几个方面考虑：
1）退火温度过高,引物结合不上去,适当调低1~2度试试看
2）模板存放时间是否过长,已经降解了
3）核对引物是不是加错了,不是对应的引物
4）酶的量适当多加一点试试看

1年前

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inzaghi1019 幼苗

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1、PCR总是没结果，这个是正常的！
2、不要灰心。慢慢来，多做，重复做，只要方法正确，还是能做出来的。我以前也经常P不出来。反复无数次之后，就出来了。
3、说实话，楼上的回答确实没错。但是，事实上，运气也很重要（我总结的）。
4、你先按照楼上的建议做，都没问题了，剩下的就看运气了。...

1年前

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wusong110 幼苗

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以下是摘自一些论坛的建议，你可以参考一下：
1.MARKER能清楚看见的话，那么电泳应该没有什么问题。
2.PCR过程重复过程有没有什么忘记加的东西，比如酶。
3.如果确定每种反应物都加了的话，可以稍微调整一下反应条件，温度或者反应成分的量。
4.如果还不行，考虑更换试剂做（可能由于保存问题当中不存在目的基因）
祝你好运，尽快成功。...

1年前

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