PCR和实时荧光定量PCR这两种有什么区别?

PCR和实时荧光定量PCR这两种有什么区别?
希望能稍微介绍一下这两种PCR的原理
lxl0202 1年前 已收到1个回答 举报

xym111222333 春芽

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PCR(聚合酶链式反应)是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链.
实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法.
普通PCR和实时荧光定量PCR的不同,是不同在实时荧光定量PCR的系统中加入了荧光染料(SYBR Green 或Taqman 探针等等).以SYBR Green为例,这种染料可以结合在双链的DNA上,当PCR不断进行时,每一次退火生成的双链DNA也在增加,荧光染料结合也越多,荧光也越强.在机器中有一个探测荧光的探头,可以定量检测荧光的强度,转换成数值.这样就可以实时记录反映体系中DNA的反应情况.

1年前 追问

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lxl0202 举报

实时荧光定量PCR的结果 亮度越强代表着什么?

举报 xym111222333

体系中的核酸越多。(如果染料足够的话)
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