PCR阴性对照始终有条带上一次PCR的阴性对照跑出来一条带.而且跟我的目标片段位置目测是一样的.我的片段大小加上两段引物

PCR阴性对照始终有条带
上一次PCR的阴性对照跑出来一条带.而且跟我的目标片段位置目测是一样的.我的片段大小加上两段引物,长度是160BP.
大家都说是加错样了或者污染了.昨天特意到超净台里重新做了一次.仍然是这样.我要疯了.为什么.是不是我的无菌水有问题.我本周刚灭的菌啊.
我说的阴性对照是指不加模板 加水的。。
刚百度了一下发现有人说的阴性对照好像和我指的不是一个意思。。
翱翔苍空的雄鹰 1年前 已收到3个回答 举报
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tian_shi 幼苗

共回答了16个问题采纳率：93.8% 举报

明白你的意思,你这个阴性对照出现目的条带,一个原因：就是你的PCR体系中任一一个试剂被模板污染了,把把PCR的试剂全部换新,重新来试,明白了吗
我也遇到过这样的问题

1年前 追问

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翱翔苍空的雄鹰 举报

很有可能。 悲催。

纷纷机将 幼苗

共回答了277个问题 举报

要么是无菌水污染了 不过我更觉得是你的目的片段太短了 那个条带只是引物聚体 你可以再多跑一会看能不能跑开 还有就是你P目的片段后有没有测序确定你扩增出来了 这么短的 说不定你目测的什么目的片段也只是引物聚体而已目的片段没有错。测序过。是用于荧光定量的。所以必须小。 引物聚体不会在这个位置上吧。都已经接近200的位置了。所以让你再跑一会啊 毕竟marker的浓度是很大的 要不然还有什么可能呢 什么...

1年前

2

speed2006 幼苗

共回答了17个问题 举报

不仅仅怀疑水的问题，也有可能模板混进了引物里，或是buffer里，dNTP里，都有可能，最好就是全部都换新的，试一试。
省时省气省钱！不要试图去寻找哪个样品污染了，那是浪费时间力气金钱！

1年前

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