琼脂糖电泳能检测50bp的DNA条带吗

琼脂糖电泳能检测50bp的DNA条带吗
能用琼脂糖电泳检测的50bpDNA条带吗?我用过2%的胶,80V电泳.Mark是PBR322/Mspl,电泳了90分钟,Mark还没跑开.我都先后看了30分钟,60分钟,90分钟的电泳效果图,都没有目的条带(点样2ul).像这种短片段DNA能用琼脂糖电泳检测吗?琼脂糖浓度为多少?电泳多长时间?DNA的点样量有什么要求不?是不是有什么操作诀窍?请大家帮帮忙啊.
谢谢你们的建议,我会再尝试的。请问Mark没跑开不是时间问题吗?我的电压是80V,电泳缓冲液也是新配的TAE,应该这方面没什么问题。再说,如果这些条件有问题,那目的带肯定也跑不出来啊(我是通过酶切跑电泳的,一个条带5000bp,一个50bp,5000bp的看到了而且很亮,50bp的就没见到)。我再想如果50bp的目的带只要跑30分钟,而Mark要跑60分钟甚至更长,那就不能在一块胶上跑了,等Mark跑开了,我的目的带也跑出去了。。。请问你们在做这个时用的什么Mark?你们还有什么好建议吗?期待你的帮助。。。。
zjrong025 1年前 已收到4个回答 举报

网球美眉 幼苗

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2%浓度的胶已经够了,120V,30分钟以内;但是说实话50bp的东西肯定不会很明显,我最低做过80bp的,勉强能看到条带,50bp琼脂糖胶应该也能看到的.
另外,你电泳MARK没跑开说明你的电泳实验存在问题,请检查你的电泳仪电压电流,电泳槽接触是否良好,电泳缓冲液浓度是否正确

1年前

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我本妖精 幼苗

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胶浓度改成1% 或者0.5%的电压120 40分钟就能跑出来你条带是50bp的建议你用50bpladder跑

1年前

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郁苇1982 幼苗

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聚丙烯酰胺胶试试考虑过吗?还有琼脂糖凝胶,1.5%试试,你上样量太低,尤其片段那么小,最少上5ul-10ul,110V电压也调一下。
顺便说下MARK上样量也要在6ul左右,别太低了。

1年前

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乡医为命 幼苗

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把点样量加到5ul看看,不行就10ul,如果你只要看大小不看亮度的话,50bp的即使能跑出来也很淡,你看不见是很正常的。

1年前

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