全基因组DNA双酶切,没有弥散条带或者条带异常

全基因组DNA双酶切,没有弥散条带或者条带异常
全基因组DNA双酶切（HpaⅡ和EcoRⅠ、MspⅠ和EcoRⅠ,110V琼脂糖电泳没有弥散条带,加大DNA的量酶切后,条带异常和从前不同.酶切产物连接完,做PCR扩增也扩不出条带,或者条带太少.
我的酶产品是Promega买的,已经用了半年.
酶切体系是：
（1）DNA 1.5 ul(约500ng)
HpaⅡ(MBI) 0.8 ul
EcoRⅠ(MBI) 0.4 ul
10*Buffer 2.5 ul
灭菌超纯水 19.8 ul
25 ul
于373-4h.
（2）DNA 1.5 ul(约500ng)
MspⅠ(MBI) 0.5 ul
EcoRⅠ(MBI) 0.4 ul
10*Buffer 2.5 ul
灭菌超纯水 20.23 ul
25 ul
于37℃放置3-4h.
哪里出了问题,导致酶切电泳没有条带.