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(1)基因表达载体的结构包括启动子、目的基因、终止子以及标记基因.
(2)在构建基因表达载体时,需用限制酶对目的基因和质粒进行切割以形成相同的黏性末端.质粒如果用限制酶Ⅱ来切割的话,将会在质粒在出现两个切口且抗生素抗性基因全被破坏,故质粒只能用限制酶Ⅰ切割(破坏四环素抗性而保留氨苄青霉素抗性,即将来形成的重组质粒能在含氨苄青霉素的培养基中生存,而在含四环素的培养基中不能生存);目的基因两端都出现黏性末端时才能和质粒发生重组,故目的基因只有用限制酶Ⅱ切割时,才会在两端都出现黏性末端.
(3)将基因表达载体导入细菌B之前,要将细菌B放入一定浓度的CaCl2溶液中处理,使之成为感受态的细菌.
(4)因本题上有2个标记基因,但抗四环素基因被插入的基因破坏掉,因此剩下的是抗氨苄青霉素抗性基因,如果在含氨苄青霉素的培养基上能生长,说明已经导入了重组质粒或普通质粒A,因为普通质粒和重组质粒都含有抗氨苄青霉素的基因.
(5)根据题意可知,科学家从预期人的生长激素的功能出发,推测相应的脱氧核苷酸序列,并人工合成了双链DNA片段,该过程中运用了蛋白质工程技术.
故答案为:
(1)标记基因
(2)限制酶Ⅱ限制酶Ⅰ
(3)感受态
(4)质粒或重组质粒
(5)蛋白质工程
点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术;蛋白质工程.
考点点评: 本题结合转基因大肠杆菌的培育过程图,考查基因工程的相关知识,要求考生识记基因工程的工具及作用;识记基因工程的操作步骤及各步骤采用的方法和注意事项,能结合图中信息答题.
1年前
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