(2010•丹阳市模拟)科学家从预期人的生长激素的功能出发,推测相应的脱氧核苷酸序列,并人工合成了双链DNA片段,获得双

(2010•丹阳市模拟)科学家从预期人的生长激素的功能出发,推测相应的脱氧核苷酸序列,并人工合成了双链DNA片段,获得双链DNA.科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的质粒进行重组,并成功地在大肠杆菌中得以表达.已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-GGATCC-,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-GATC-.据图回答:

(1)建构基因表达载体时,必须有启动子、目的基因、终止子以及______.
(2)为便于重组和筛选,图中的目的基因需用______切割,质粒需用______切割.
(3)将基因表达载体导入细菌B之前,要将细菌B放入一定浓度的CaCl2溶液中处理,使之成为______
的细菌.
(4)将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上,能够生长的,说明已导入了______,反之则没有导入.
(5)上述制备人的生长激素,运用的现代生物工程技术是______.
花下 1年前 已收到1个回答 举报

jialovejing124 幼苗

共回答了15个问题采纳率:86.7% 举报

解题思路:据图分析,①是以mRNA为模板合成DNA的过程,通过逆转录获取目的基因的过程,②是构建基因表达载体的过程,此过程需要限制酶和DNA连接酶.③是将目的基因导入受体细胞的过程,受体细胞是微生物,常用一定浓度的钙离子溶液作用于微生物,使其处于感受态.所有的生物共用一套密码子,是目的基因在受体细胞内成功表达的基础.标记基因可以检测重组质粒是否导入受体细胞中.

(1)基因表达载体的结构包括启动子、目的基因、终止子以及标记基因.
(2)在构建基因表达载体时,需用限制酶对目的基因和质粒进行切割以形成相同的黏性末端.质粒如果用限制酶Ⅱ来切割的话,将会在质粒在出现两个切口且抗生素抗性基因全被破坏,故质粒只能用限制酶Ⅰ切割(破坏四环素抗性而保留氨苄青霉素抗性,即将来形成的重组质粒能在含氨苄青霉素的培养基中生存,而在含四环素的培养基中不能生存);目的基因两端都出现黏性末端时才能和质粒发生重组,故目的基因只有用限制酶Ⅱ切割时,才会在两端都出现黏性末端.
(3)将基因表达载体导入细菌B之前,要将细菌B放入一定浓度的CaCl2溶液中处理,使之成为感受态的细菌.
(4)因本题上有2个标记基因,但抗四环素基因被插入的基因破坏掉,因此剩下的是抗氨苄青霉素抗性基因,如果在含氨苄青霉素的培养基上能生长,说明已经导入了重组质粒或普通质粒A,因为普通质粒和重组质粒都含有抗氨苄青霉素的基因.
(5)根据题意可知,科学家从预期人的生长激素的功能出发,推测相应的脱氧核苷酸序列,并人工合成了双链DNA片段,该过程中运用了蛋白质工程技术.
故答案为:
(1)标记基因
(2)限制酶Ⅱ限制酶Ⅰ
(3)感受态
(4)质粒或重组质粒
(5)蛋白质工程

点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术;蛋白质工程.

考点点评: 本题结合转基因大肠杆菌的培育过程图,考查基因工程的相关知识,要求考生识记基因工程的工具及作用;识记基因工程的操作步骤及各步骤采用的方法和注意事项,能结合图中信息答题.

1年前

9
可能相似的问题
Copyright © 2024 YULUCN.COM - 雨露学习互助 - 16 q. 0.080 s. - webmaster@yulucn.com