196051
幼苗
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楼主你对标记基因本身理解就有错误啊,标记基因本身作用就是标记,而不是要在它的里面做标记.所谓标记基因,经常是用于检测转基因时基因是否正确插入目标物种中并且顺利表达了.在基因工程中,狭义上,标记基因是指能够表现出特殊表型的基因,这些基因能够使目的基因插入和表达可视化.比如GFP(绿色荧光蛋白)或者GUS报告基因,在操作中,可以将这些基因和目的基因进行融合表达,那么如果目的基因表达了,那么就能通过这些报告基因的表型来检测基因是否表达和表达量的多少.比如检测GFP的荧光强度,或者GUS染色的情况等等.因为很多基因的表型并不是明显的,这些基因往往能够让基因的表达可视化,甚至能够做到表达的蛋白在细胞中的定位.
另外对于DNA插入的位置,同位素示踪法是不能检测出来的,因为这个方法只能从物理层面来指示出同位素的位置,我们并不能用它定位DNA在哪条染色体的哪个位置,这个位置并不是一个很纯粹的物理性概念,而应该归类于一个生化上的概念.一般对于DNA的插入位点,都是利用染色体步移法来做的.再另外,如果用同位素法检测是否插入的话,有一个非常重大的问题,就是同位素的放射性对生物体本身的一个伤害.放射性致DNA变异导致生物体死亡或者畸变,这个我相信楼主应该是知道吧,你觉得这个用于活体细胞实验现实不?
1年前
追问
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gaoxiao00006
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嗯谢谢。。。我对您的回答基本同意,但是我对最后一点有点疑惑,放射性元素是怎么对生物体造成影响的?我是这么想的,如果标记N的话,也就是说它现在有了放射性了是吧,拿大肠杆菌做例子的话,您的意思就是说标记了的N有放射性会使大肠杆菌其他的基因突变是吧,所以这样很危险,是么?