在遗传工程技术中，限制性内切酶主要用于（　　）

解题思路：限制性核酸内切酶（限制酶）主要来源是从原核生物中分离纯化出来的．能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性．经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端．

A、目的基因获取需要限制酶切割DNA分子．目的基因导入受体细胞，不同种受体细胞导入的方法不同，但不需要限制酶，A错误；
B、目的基因导入不需要限制酶切割，检测可以利用DNA分子杂交技术，B错误；
C、目的基因与运载体结合是基因表达载体构建过程，此时需要同一种限制酶切割目的基因和运载体，使它们露出相同的黏性末端或平末端，之后用DNA连接酶连接成基因表达载体．导入不需要限制酶切割，C错误；
D、获取目的基因需要限制酶切割DNA分子．基因表达载体构建过程，此时需要同一种限制酶切割目的基因和运载体，使它们露出相同的黏性末端或平末端，D正确．
故选：D．

点评：
本题考点： 基因工程的原理及技术．

考点点评： 本题考查了基因工程的相关内容，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系．

如果不把运载体切出结合位点怎么连目的基因啊！所以要用限制性内切酶！

你把基因切了,总得把运载体也切开吧~不然咋连啊~