(2013•嘉定区一模)回答下列有关基因工程的问题

(2013•嘉定区一模)回答下列有关基因工程的问题
图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列.现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG.请回答下列问题:

(1).若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,其产物长度为______.
若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d.从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,产物中共有______种不同DNA片段.
(2).若同时用限制酶MspⅠ、MboⅠ切割图2中的质粒,则可得到______个DNA片段.
(3).若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是______.
为了筛选出成功过导入含目的基因D的重组质粒的大肠杆菌,一般可进行如下步骤筛选
(4).第一步:将大肠杆菌在含______的培养基上培养,得到如图1的菌落.
第二步:再将灭菌绒布按到培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到含______的培养基上培养,得到如图2的结果(空圈表示与图1对照无菌落的位置).
第三步:选出图1培养皿中的某些菌落进行培养,即可得到含重组质粒的大肠杆菌.

请在答题纸图3中圈出一个含目的基因的重组质粒的大肠杆菌的菌落?
(5).在选出的大肠杆菌内基因D能成功表达的原因是______.其表达产物是一条多肽链,如考虑终止密码,则其至少含有的O原子数为______.
百花园里的紫菜苔 1年前 已收到1个回答 举报

1003night 幼苗

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解题思路:分析图1:图中DNA片段含有2个限制酶SmaⅠ切割位点,可被限制酶SmaⅠ切割产生长度为534+3=537bp、796-3-3=790bp、658+3=661bp的三中DNA片段.基因D两侧序列为GGATCC,可被限制酶BamHⅠ切割.
分析图2:质粒含有CCGG序列、GGATCC序列和GATC序列,其中CCGG序列可被限制酶MspⅠ切割,GGATCC序列和GATC序列可被限制酶MboⅠ切割.用限制酶BamHⅠ切割破坏了抗生素A抗性基因,但没有破环抗生素B抗性基因,因此含有重组质粒的大肠杆菌能抗抗生素B,但不能抗抗生素A.

(1)根据图1中的酶切位点,可判断用限制酶SmaⅠ完全切割该DNA片段,其产物长度为537bp、790bp、661bp.若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,基因D就突变为基因d,那么基因d上只有一个限制酶SmaⅠ切割位点,被限制酶SmaⅠ切割的产物长度为534+796-3=1327kb、658+3=661bp.因此从杂合子(Dd)分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,产物中共有4种不同DNA片段.
(2)限制酶MspⅠ的识别序列是C↓CGG,可将质粒上的CCGG序列切开;限制酶MboⅠ的识别序列是↓GATC,可将质粒上的GGATCC序列和GATC序列切开,因此同时用限制酶MspⅠ、MboⅠ切割图2中的质粒,则可得到3个DNA片段.
(3)由图1可知,目的基因两侧是GGATCC序列,该序列是限制酶BamHⅠ的识别序列,因此要将质粒和目的基因D连接形成重组质粒,应选用限制酶BamHⅠ切割.
(4)用限制酶BamHⅠ切割质粒后,用限制酶BamHⅠ切割破坏了抗生素A抗性基因,但没有破环抗生素B抗性基因,因此首先用含有抗生素B的培养基培养大肠杆菌,能生存下来的是含有普通质粒和重组质粒的大肠杆菌;再用含有抗生素A的培养基培养,能生存下来的是含有普通质粒的大肠杆菌.最后能在培养皿1上生存,但不能在培养皿2上生存的大肠杆菌菌落进行培养,即可得到含重组质粒的大肠杆菌.
(5)不同生物共用一套遗传密码子,所以基因D能再大肠杆菌内成功表达.基因D含有1020对碱基,能翻译形成含有1020/3=340个氨基酸的多肽链.多肽链含有O原子数=肽键数+2肽链数+R基中的O原子数,所以该多肽至少含有O原子数为341个.
故答案:(1)537bp、790bp、661bp 4
(2)3
(3)BamHⅠ
(4)抗生素B 抗生素A
(5)不同生物共用一套遗传密码子 341

点评:
本题考点: 基因工程的应用;微生物的分离和培养.

考点点评: 本题考查基因工程操作的相关知识,意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点的能力;能运用所学知识与观点,通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理,做出合理的判断或得出正确的结论的能力.

1年前

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