PCR产物为什么会出现100~200bp的条带

PCR产物为什么会出现100~200bp的条带
我用菌落PCR检测library质粒扩增质量,引物用的是takara的M13正反引物,目的质粒基因长度为~500bp.PCR完后电泳图谱显示~750bp有较明显条带,很奇怪的就是100~200bp有很明显的条带,共两条,类似于RNA,但从1.5ml的液体培养基中只取了3ul菌液进行菌落PCR,原菌中所带来的RNA应该不多,且PCR105℃的热盖也应将RNA降解掉了.200bp条带为何物,是如何来的?
笑看小桥风月 1年前 已收到4个回答 举报
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singhua520 种子

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你的目的片段长度为500bp,而你的电泳图谱显示是750bp;你对电泳图谱750bp的片段是认可的,也就是说除去目的片段500bp,还有150bp的引物及其他序列；而你的杂带大小平均恰好是150bp,也就是除去150bp的引物及其他序列,应该不含有其他的DNA序列,因此判断你的150bp的条带就是引物二聚体造成的,如果条带非常亮的话,可以考虑减少引物的加入量.

1年前

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sn001 幼苗

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也碰到了这种情况，搞得很是纠结你后来是怎么解决的？分享一下，谢谢

1年前

1

30岁前退休 幼苗

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可能是引物多聚物吧。。
可以适量减少引物的量试试

1年前

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纷纷机将 幼苗

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引模二聚体 做PCR都会有的

1年前

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你能帮帮他们吗

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